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Novo método para análise automatizada da organização do tecido tendíneo corado por Hematoxilina-Eosina (H&E)

dc.contributor.advisor1Silva, Flávio Santos da
dc.contributor.authorFernandes, Arthur Henrique
dc.contributor.referee1Lima, Emanuel Kennedy Feitosa
dc.contributor.referee2Lima, Telma de Sousa
dc.date.accessioned2022-05-30T15:45:11Z
dc.date.available2022-05-30
dc.date.available2022-05-30T15:45:11Z
dc.date.issued2020-01-31
dc.description.abstractIntroduction: Tendons are fibrous organs, histologically formed by tenocytes and an extracellular matrix with a hierarchical collagenous structure. In cases of injuries, tendinopathies, changes in tendon morphology arise, such as: hypercellularity, changes in phenotype and loss of uniformity in the spatial orientation of tenocytes. Whereas this important correlation between the tendinous histological changes and their biomechanical properties, the scarcity of accurate methods of tendon analysis and the need for automation in the study of tendinopathies, the development of analysis methods that explore tendinous microarchitecture is promising. Objective: Validate a new method for automated analysis of the tendon tissue organization stained with hematoxylin-eosin. Methodology: This is a methodological study for routine validation of automated analysis of the organization of tendon tissue. Histological slides from Wistar rats submitted to partial tenotomy of the right calcaneus tendon were used, keeping the left one as a control. After 35 days of repair, the animal was euthanized for collection and microscopic analysis of the tendons stained with hematoxylin-eosin. Images of four histological fields (20x objective) were captured from the middle third of each tendon. The images were processed using the ImageJ software, using an automated computational routine. Subsequently, an analysis of the efficiency of the method in detecting the tenocyte nucleus and its use in the comparison between control and injured tendons was performed, considering three variables: cellularity, aspect ratio (AR) and circular standard deviation (CSD). The CSD was calculated using circular statistics and the data were compared using a t test, assuming p <0.05. All calculations were performed using Microsoft Excel 2010 software (Microsoft Corporation, USA). Results: The method showed an efficiency of 87.27% to 96.96% in the isolation of tenocytes. Concerning the comparison between control and injured tendon images, the method showed an average CSD of 6.19 ± 0,96 in the control group and 10.46 ± 1,71 in the injured group (p <0.05); mean cellularity of 61.50 ± 12,23 in the control group and 111.00 ± 4,08 in the injured group (p <0.05); average aspect ratio of 4.01 ± 0,43 in the control and 3.33 ± 0,35 in the injured group (p <0.05). Conclusion: The results of the present study showed that the new method developed for automated analysis of the organization of tendon tissue is efficient in detecting the tenocytes nuclear profiles, as well as in the comparison between healthy and injured tendons.pt_BR
dc.description.resumoIntrodução: Tendões são órgãos fibrosos, histologicamente constituídos por tenócitos e matriz extracelular com estrutura colagenosa hierarquizada. Em casos de lesões, as tendinopatias, surgem alterações na morfologia tendínea, como: hipercelularidade, mudanças no fenótipo e perda da uniformidade na orientação espacial dos tenócitos. Tendo em vista essa importante correlação entre as alterações histológicas tendíneas e suas propriedades biomecânicas, a escassez de métodos acurados de análise tendínea e da necessidade de automatização no estudo das tendinopatias, mostra-se promissor o desenvolvimento de métodos de análise que explorem a microarquitetura tendínea. Objetivo: Validar novo método para análise automatizada da organização do tecido tendíneo corado com hematoxilina-eosina. Metodologia: Trata-se de um estudo metodológico para validação de rotina de análise automatizada da organização do tecido tendíneo. Foram utilizadas lâminas histológicas de rato Wistar submetido a tenotomia parcial do tendão calcâneo direito, mantendo o esquerdo como controle. Após 35 dias de reparo, o animal foi eutanasiado para coleta e análise microscópica dos tendões corados com hematoxilina-eosina. Foram capturadas imagens de quatro campos histológicos (objetiva de 20x) a partir do terço médio de cada tendão. As imagens foram processadas com uso do software ImageJ, a partir de rotina computacional automatizada. Posteriormente foi realizada análise da eficiência do método na detecção do núcleo de tenócitos e seu uso na comparação entre tendões controle e lesionado, considerando três variáveis: celularidade, razão de aspecto (RA) e desvio padrão circular (DPC). O DPC foi calculado com uso da estatística circular e os dados foram comparados aplicando-se teste t, admitindo-se p<0,05. Todos os cálculos foram realizados com uso do software Microsoft Excel 2010 (Microsoft Corporation, USA). Resultados: O método apresentou eficiência de 87,27% a 96,96% no isolamento dos tenócitos. Em relação à comparação entre imagens de tendão controle e lesionado, o método mostrou DPC médio de 6,19 ± 0,96 no grupo controle e 10,46 ± 1,71 no grupo lesionado (p<0,05); celularidade média de 61,50 ± 12,23 no grupo controle e 111,00 ± 4,08 no grupo lesionado (p<0,05); RA média de 4,01 ± 0,43 no controle e 3,33 ± 0,35 no grupo lesionado (p<0,05). Conclusão: Os resultados do presente estudo mostraram que o novo método desenvolvido para análise automatizada da organização do tecido tendíneo é eficiente na detecção dos perfis nucleares dos tenócitos, assim como na comparação entre tendões saudáveis e lesionados.pt_BR
dc.description.sponsorshipTrabalho não financiado por agência de fomento, ou autofinanciadopt_BR
dc.identifier.citationCitação com autor incluído no texto: Fernandes (2020) Citação com autor não incluído no texto: (FERNANDES, 2020)pt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufersa.edu.br/handle/prefix/7137
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal Rural do Semi-Áridopt_BR
dc.publisher.centerCentro de Ciências Biológicas e da Saúde - CCBS
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.departmentCentro de Ciências Biológicas e da Saúde - CCBSpt_BR
dc.publisher.initialsUFERSApt_BR
dc.relation.referencesFERNANDES, Arthur Henrique. Novo método para análise automatizada da organização do tecido tendíneo corado por Hematoxilina-Eosina (H&E). 2020. 48 f. Monografia (Graduação em Medicina) - Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró, 2020.pt_BR
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccesspt_BR
dc.rights.licenseCC-BY-SApt_BR
dc.subjectTendõespt_BR
dc.subjectMorfometriapt_BR
dc.subjectHistologiapt_BR
dc.subject.cnpqCIENCIAS DA SAUDE::MEDICINApt_BR
dc.titleNovo método para análise automatizada da organização do tecido tendíneo corado por Hematoxilina-Eosina (H&E)pt_BR
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesispt_BR
dc.type.subtypeMonografiapt_BR

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