Influência das soluções de criopreservação sobre a Conservação de células somáticas de catetos, Pecari tajacu (LINNAEUS, 1758)
| dc.contributor.advisor1 | Pereira, Alexsandra Fernandes | |
| dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/ | pt_BR |
| dc.contributor.author | Lira, Gabriela Pereira de Oliveira | |
| dc.contributor.referee1 | Moura, Carlos Eduardo Bezerra de | |
| dc.contributor.referee1Lattes | http://lattes.cnpq.br/ | pt_BR |
| dc.contributor.referee2 | Borges, Alana Azevedo | |
| dc.contributor.referee2Lattes | http://lattes.cnpq.br/ | pt_BR |
| dc.creator.Lattes | http://lattes.cnpq.br/ | pt_BR |
| dc.date.accessioned | 2019-12-09T14:19:13Z | |
| dc.date.available | 2019-12-09T14:19:13Z | |
| dc.date.issued | 2019-02-26 | |
| dc.description | Monografia | pt_BR |
| dc.description.abstract | Não possui | pt_BR |
| dc.description.resumo | A formação de criobancos de recursos somáticos representa uma ferramenta interessante para a conservação de catetos, espécie de relevante papel ecológico, econômico e científico. Contudo, o emprego eficiente desses recursos em biotecnologias, visando a obtenção de embriões clones ou produção de células induzidas à pluripotência, depende da solução de criopreservação utilizada durante a formação dos bancos. Portanto, o objetivo do estudo foi avaliar a influência de diferentes combinações de crioprotetores extracelulares (sacarose; soro fetal bovino 10% vs. 50%) sobre a qualidade de células somáticas de catetos. Para tanto, fragmentos de pele do pavilhão auricular apical foram recuperados de quatro animais, tricotomizados e cultivados in vitro. Ao atingir 70% de confluência, as células foram subcultivadas e, posteriormente, submetidas à congelação lenta usando o meio essencial mínimo modificado por Dulbecco acrescido de crioprotetores, de acordo com os grupos experimentais: 10% de DMSO [DMSO]; 10% de DMSO e 0,2 M de SAC [DMSO-SAC]; 10% de DMSO e 10% de SFB [DMSO-10SFB]; 10% de DMSO e 50% de SFB [DMSO-50SFB]; 10% DMSO, 0,2 M de SAC e 10% de SFB [DMSO-SAC-10SFB); e 10% de DMSO, 0,2 de SAC e 50% de SFB [DMSO-SAC-50SFB]. Células não-criopreservadas e criopreservadas foram avaliadas quanto às características morfológicas, integridade de membrana pelo ensaio de azul de tripan, atividade proliferativa pela determinação da curva de crescimento, atividade metabólica pelo ensaio de brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil tetrazolium] e estresse oxidativo pela análise dos níveis de espécies reativas de oxigênio (EROs) usando a sonda diacetato de 2’,7’-diclorodihidrofluoresceína (H2DCFDA) e pela análise do potencial de membrana mitocondrial pela sonda MitoTracker Red (CMXRos). Todos os dados foram expressos como média ± erro padrão e comparações foram realizadas usando ANOVA seguida de teste de Tukey (P < 0,05). Assim, a criopreservação, independente da solução de crioprotetores, não alterou a morfologia celular, mantendo seu aspecto fusiforme e núcleo central ovalado. Além disso, a criopreservação, independente da solução de crioprotetores, não influenciou a viabilidade avaliada pelo ensaio de integridade de membrana realizado tanto imediatamente após a descongelação, quanto após a primeira e terceira passagem após a descongelação (P > 0,05). Contudo, células criopreservadas em DMSO sozinho apresentaram uma redução da viabilidade após a terceira passagem pós-descongelação (P < 0,05). Quanto à atividade proliferativa, apenas células criopreservadas em DMSO-10SFB apresentaram uma redução no seu tempo de duplicação (10,5 ± 2,8 h), quando comparado ao grupo não criopreservado (19,3 ± 2,3 h). Embora a criopreservação tenha reduzido a atividade metabólica, nenhuma diferença foi observada entre as soluções de criopreservação (P > 0,05). Quanto à análise do estresse oxidativo, um menor nível de EROs foi observado nas células criopreservadas em DMSO-SAC-50SFB (1,94 ± 0,05 unidades de fluorescência arbitrária) entre todos os grupos de células criopreservadas. Adicionalmente, somente células do grupo DMSO-SAC-50SFB (1,10 ± 0,05) apresentaram potencial de membrana mitocondrial similar ao grupo não criopreservado (1,00 ± 0,04; P < 0,05). Em conclusão, 10% de DMSO associado com 0,2 M de sacarose e 50% de SFB foi a solução de crioprotetores mais eficiente para a conservação de células somáticas de catetos. Essas informações irão contribuir para a formação de criobancos, visando à conservação de recursos biológicos desta espécie | pt_BR |
| dc.description.sponsorship | Trabalho não financiado por agência de fomento, ou autofinanciado | pt_BR |
| dc.identifier.citation | Lira (2019) (LIRA, 2019) | pt_BR |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.ufersa.edu.br/handle/prefix/1629 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.ufersa.edu.br/handle/prefix/3208 | |
| dc.language | por | pt_BR |
| dc.publisher | Universidade Federal Rural do Semi-Árido | pt_BR |
| dc.publisher.country | Brasil | pt_BR |
| dc.publisher.department | Centro de Ciências Biológicas e da Saúde - CCBS | pt_BR |
| dc.publisher.initials | UFERSA | pt_BR |
| dc.relation.references | LIRA, Gabriela Pereira de Oliveira. Influência das soluções de criopreservação sobre a Conservação de células somáticas de catetos, Pecari tajacu (LINNAEUS, 1758). 2019. 68f. Monografia (Graduação em Biotecnologia), Centro de Ciências Biológicas e da Saúde, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró, 2019. | pt_BR |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | pt_BR |
| dc.rights.license | CC-BY-SA | pt_BR |
| dc.subject | Criotolerância | pt_BR |
| dc.subject | Mamíferos silvestres | pt_BR |
| dc.subject | Recursos somáticos | pt_BR |
| dc.subject | Crioprotetores extracelulares | pt_BR |
| dc.subject.cnpq | CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOTECNOLOGIA | pt_BR |
| dc.title | Influência das soluções de criopreservação sobre a Conservação de células somáticas de catetos, Pecari tajacu (LINNAEUS, 1758) | pt_BR |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/bachelorThesis | pt_BR |