Idade da doadora e diferentes gêneros receptores: respostas ao xenotransplante ovariano ovino por longo período de cultivo

Abstract

O estoque de folículos primordiais e primários existente em ovários fetais representa um potencial inexplorado que pode ser cultivado para fins de reprodução, preservação ou pesquisa. Adicionalmente, a utilização de receptores masculinos imunodeficientes no xenotransplante ovariano fornece mais uma oportunidade de aproveitamento de material genético que poderia ser perdido. Dessa forma, objetivou-se avaliar o desenvolvimento e viabilidade do tecido ovariano ovino, na fase fetal e na fase prépubere, xenotransplantado a fresco, em diferentes linhagens e sexo de camundongos imunossuprimidos. Para o primeiro experimento, ovários de fetos ovinos (100-140 dias) foram colhidos após o abate de suas genitoras, divididos em pequenos fragmentos (1 mm3 ) que foram destinados a avaliação controle e ao xenotransplante a fresco. Foram utilizadas cinco receptoras da linhagem C57BL/6 SCID para o xenotransplante. Cinco dias após o procedimento cirúrgico, as camundongas receptoras foram submetidas ao lavado vaginal durante 60 dias. Ao final desse período foram eutanasiadas e procedeu-se com a coleta dos transplantes para avaliações macro e microscópicas. Observou-se que em 80% das fêmeas receptoras o padrão citológico do lavado vaginal alternou entre diestro-proestro-diestro, não sendo observadas as fases de estro e metaestro durante o período experimental. Na análise histológica foi constatado que a neovascularização ocorreu em 80% dos tecidos recuperados. Observou-se também folículos pré-antrais e antrais (menores) e sem alterações morfológicas, no entanto, não foram obtidos folículos antrais com mais de 1mm. Corpos lúteos também não foram visualizados. No segundo experimento, fragmentos ovarianos (1 mm3 ) de ovelhas jovens foram xenotransplantados a fresco em receptores machos da linhagem C57BL/6 SCID (n = 5) e BALB/c Nude (n = 5). Após 65 dias do xenotransplante, os animais foram eutanasiados e os transplantes avaliados quanto às características macroscópicas, microscópicas e o desenvolvimento oocitário in vitro. Foi observado nos ovários recuperados dos animais da linhagem C57BL/6 SCID grande consumo folicular. Dos folículos morfologicamente normais restantes, a maioria era primordial. Adicionalmente, áreas com tecido cicatricial semelhante ao corpo albicans também foram encontradas. Nos transplantes recuperados dos animais da linhagem BALB/c Nude foi observado consumo folicular moderado, apresentando baixa taxa de folículos primordiais e primários normais e alta proporção de primordiais atrésicos. Adicionalmente, recuperou-se um oócito, o qual foi submetido à maturação, fecundação e cultivo in vitro sem, contudo, apresentar desenvolvimento embrionário. Considerando que utilizou-se doadoras da mesma espécie, conclui-se que a idade da doadora, a espécie receptora e o período para a coleta do tecido ovariano devem ser adaptados para melhores resultados