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metadata.dc.type: Tese
Title: Idade da doadora e diferentes gêneros receptores: respostas ao xenotransplante ovariano ovino por longo período de cultivo
metadata.dc.creator: Santos, Fernando Araujo dos
metadata.dc.contributor.advisor1: Bezerra, Marcelo Barbosa
metadata.dc.contributor.referee1: Bezerra, Marcelo Barbosa
metadata.dc.contributor.referee2: Moura, Carlos Eduardo Bezerra de
metadata.dc.contributor.referee3: Bezerra, Francisco Silvestre Brilhante
metadata.dc.contributor.referee4: Silva, Gerlane Modesto da
metadata.dc.contributor.referee5: Farias, Naisandra Bezerra da Silva
metadata.dc.description.resumo: O estoque de folículos primordiais e primários existente em ovários fetais representa um potencial inexplorado que pode ser cultivado para fins de reprodução, preservação ou pesquisa. Adicionalmente, a utilização de receptores masculinos imunodeficientes no xenotransplante ovariano fornece mais uma oportunidade de aproveitamento de material genético que poderia ser perdido. Dessa forma, objetivou-se avaliar o desenvolvimento e viabilidade do tecido ovariano ovino, na fase fetal e na fase prépubere, xenotransplantado a fresco, em diferentes linhagens e sexo de camundongos imunossuprimidos. Para o primeiro experimento, ovários de fetos ovinos (100-140 dias) foram colhidos após o abate de suas genitoras, divididos em pequenos fragmentos (1 mm3 ) que foram destinados a avaliação controle e ao xenotransplante a fresco. Foram utilizadas cinco receptoras da linhagem C57BL/6 SCID para o xenotransplante. Cinco dias após o procedimento cirúrgico, as camundongas receptoras foram submetidas ao lavado vaginal durante 60 dias. Ao final desse período foram eutanasiadas e procedeu-se com a coleta dos transplantes para avaliações macro e microscópicas. Observou-se que em 80% das fêmeas receptoras o padrão citológico do lavado vaginal alternou entre diestro-proestro-diestro, não sendo observadas as fases de estro e metaestro durante o período experimental. Na análise histológica foi constatado que a neovascularização ocorreu em 80% dos tecidos recuperados. Observou-se também folículos pré-antrais e antrais (menores) e sem alterações morfológicas, no entanto, não foram obtidos folículos antrais com mais de 1mm. Corpos lúteos também não foram visualizados. No segundo experimento, fragmentos ovarianos (1 mm3 ) de ovelhas jovens foram xenotransplantados a fresco em receptores machos da linhagem C57BL/6 SCID (n = 5) e BALB/c Nude (n = 5). Após 65 dias do xenotransplante, os animais foram eutanasiados e os transplantes avaliados quanto às características macroscópicas, microscópicas e o desenvolvimento oocitário in vitro. Foi observado nos ovários recuperados dos animais da linhagem C57BL/6 SCID grande consumo folicular. Dos folículos morfologicamente normais restantes, a maioria era primordial. Adicionalmente, áreas com tecido cicatricial semelhante ao corpo albicans também foram encontradas. Nos transplantes recuperados dos animais da linhagem BALB/c Nude foi observado consumo folicular moderado, apresentando baixa taxa de folículos primordiais e primários normais e alta proporção de primordiais atrésicos. Adicionalmente, recuperou-se um oócito, o qual foi submetido à maturação, fecundação e cultivo in vitro sem, contudo, apresentar desenvolvimento embrionário. Considerando que utilizou-se doadoras da mesma espécie, conclui-se que a idade da doadora, a espécie receptora e o período para a coleta do tecido ovariano devem ser adaptados para melhores resultados.
Abstract: The stock of primordial and primary follicles in fetal ovaries represents an untapped potential that can be cultivated for purposes of reproduction, preservation or research. Additionally, the use of male immunodeficient receptors in the ovarian xenograft provides more opportunity to use genetic material that could be lost. Thus, the objective was to evaluate the development and viability of ovarian ovine tissue, in the fetal phase and in the prepubertal phase, freshly grafted, in different strains and sex of immunosuppressed mice. For the first experiment, ovaries from fetal sheep (100-140 days old) were harvested after slaughtering their mothers, divided into small fragments (1 mm3 ) that were destined for control evaluation and fresh xenotransplantation. Five C57BL/6 SCID strain recipients were used for xenotransplantation. Five days after the surgical procedure, the recipient mice were subjected to vaginal lavage for 60 days. At the end of this period, they were euthanized and the grafts were collected for macro and microscopic evaluations. It was observed that in 80% of the receiving females the cytological pattern of the vaginal lavage alternated between diestrus-proestrus-diestrus, with the estrus and metestrus phases not being observed during the experimental period. Histological analysis showed that neovascularization occurred in 80% of the recovered tissues. Pre-antral and antral follicles (smaller) and without morphological changes were also observed, however, antral follicles larger than 1 mm were not obtained. Corpus luteum was also not seen. In the second experiment, ovarian fragments (1 mm3 ) from young sheep were xenotransplanted fresh into male recipients of the C57BL/6 SCID (n = 5) and BALB/c Nude (n = 5) lines. After 65 days of xenograft, the animals were euthanized and the grafts were evaluated for macroscopic and microscopic characteristics and oocyte development in vitro. It was observed in the tissues recovered from animals of the C57BL / 6 SCID strain a high follicular consumption. Of the remaining morphologically normal follicles, most were primordial. Additionally, areas with scar tissue similar to the corpus albicans were also found. In grafts recovered from animals of the BALB/c Nude strain, moderate follicular consumption was observed, with a low rate of normal primordial and primary follicles and a high proportion of primordial atretic follicles. Additionally, an oocyte was recovered, which was subjected to maturation, fertilization and in vitro culture without, however, showing embryonic development. Considering that donors of the same species were used, it is concluded that the age of the donor, the recipient species and the period for the collection of ovarian tissue must be adapted for better results.
Keywords: Ovário fetal
Ovário pré-púbere
Ovelha
Camundongos imunossuprimidos
Tecnologia de reprodução assistida
Fetus ovarian
Prepubertal ovarian
Sheep
Immunosuppressed mice
Assisted reproduction technology
metadata.dc.subject.cnpq: CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS
metadata.dc.language: por
metadata.dc.publisher.country: Brasil
Publisher: Universidade Federal Rural do Semi-Árido
metadata.dc.publisher.initials: UFERSA
metadata.dc.publisher.department: Centro de Ciências Agrárias - CCA
metadata.dc.publisher.program: Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal
Citation: Citação com autor incluído no texto: Santos (2020) Citação com autor não incluído no texto: (SANTOS, 2020)
metadata.dc.rights: Acesso Aberto
URI: http://repositorio.ufersa.edu.br/handle/prefix/5445
Issue Date: 28-Feb-2020
Appears in Collections:DOUTORADO EM CIÊNCIA ANIMAL

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